一、簡介

Q-瓊脂糖凝膠FF是將三甲胺基烷基季銨基團(tuán)鍵合在高流速瓊脂糖微球上形成的一種強(qiáng)陰離子交換介質(zhì)。廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。

本品為白色球狀凝膠，無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhì)。

二、親和填料特性

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*檢測條件： 層析柱10mm×300mm  *柱床高15cm，25℃，流動相為0.1mol/LNaCl。.

三、 適用范圍

本產(chǎn)品具有高化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、高載量、好的機(jī)械性能、可在位清洗、多次重復(fù)使用等特點(diǎn)，非特異性吸附低，回收率高，適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)，適用于在pH工作范圍內(nèi)可形成負(fù)離子的生物大分子的分離純化，廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。

四、操作說明

1 裝柱

（1）讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制初始緩沖液（平衡液）和洗脫緩沖液。

（2）根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始緩沖液（按凝膠：緩沖液=3：1的比例）配成勻漿。

（3）將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無氣泡。

（4）用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。

（5）打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過，使柱床穩(wěn)定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。

2 平衡

讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。平衡液是低濃度的緩沖溶液，如Tris、PBS等。

3 上樣

（1）樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。

（2）一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。

（3）介質(zhì)對樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動相的離子強(qiáng)度和pH值。鹽濃度小，介質(zhì)對樣品組分吸附較牢。用DEAE介質(zhì)時(shí)，推薦的pH值是小于目標(biāo)產(chǎn)品等電點(diǎn)1個(gè)單位。

4 洗脫

Q瓊脂糖凝膠FF介質(zhì)可用增大鹽濃度或減小pH值進(jìn)行洗脫，常用增大鹽濃度的辦法洗脫。

5再生

一般用高鹽濃度的緩沖液（含1~2mol/L NaCl）洗或減小pH洗10倍以上柱體積，接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。

若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。

6 在位清洗

（1）對于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用2M NaCl去除。

（2）對沉淀蛋白、對以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類，可用1M NaOH 去除。

（3）對強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。

清洗完畢后，用至少3倍緩沖液平衡柱子。

7 注意

在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入。

在使用過程中，不能使用強(qiáng)酸，如使用酸洗，應(yīng)使用濃度低于0.1 M的冰醋酸。

8 去熱源

用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)?；蛴靡韵路椒ú襟E去除：

（1）2倍柱體積的70%乙醇；

（2）2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5；

（3）1倍柱體積4M尿素；

（4）3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M NaCl；

以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。

9 消毒

用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。

10 滅菌

置介質(zhì)于高壓滅菌鍋中120℃下30分鐘。

五、注意事項(xiàng)

產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃（保存溶液為20% 乙醇），通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。用過的柱子貯存在4℃（20% 乙醇）。避免與氧化劑接觸；避免在pH< 4的環(huán)境中長時(shí)間暴露(一周,20℃)。

  備注：產(chǎn)品信息可能會有優(yōu)化升級。請以實(shí)際標(biāo)簽信息為準(zhǔn)。

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標(biāo)題:Novel small 99mTc-labeled affibody molecular probe for PD-L1 receptor imaging

成員:Zhigang Liang, Xianwen Hu, Hongyu Hu, Pan Wang, Jiong Cai

論文因子:5.738 發(fā)表期刊:Frontiers in Oncology pmid:36387113

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標(biāo)題:Characterization of a novel lipase from Bacillus licheniformis NCU CS-5 for applications in detergent industry and biodegradation of 2,4-D butyl ester

成員:Junxin Zhao, Shichang Liu, Yifang Gao, Maomao Ma, Xianghui Yan, Ding Cheng, Dongman Wan, Zheling Zeng, Ping Yu, Deming Gong

論文因子:6.953 發(fā)表期刊:INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES pmid:33548313

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標(biāo)題:Anti-aging activities of neutral and acidic polysaccharides from Polygonum multiflorum Thunb in Caenorhabditis elegans

成員:Jing Fan, Ying Wang, Jianbo Yang, Donglin Gu, Shuai Kang, Yue Liu, Hongyu Jin, Feng Wei, Shuangcheng Ma

論文因子:8.2 發(fā)表期刊:INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES pmid:38103673

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標(biāo)題:Effects of beauvericin on the blood cells of Bombyx mori

成員:Yong Bi, Lingzhi Wu, Baozhen Li, Yanping Hao, Zixiao Li, Jiwei Zhang, Aiying Cheng, Guizhen Yuan, Jinhua Fan

論文因子:3.4 發(fā)表期刊:JOURNAL OF INVERTEBRATE PATHOLOGY pmid:37838064

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標(biāo)題:Purification and characterization of cutinase from Botrytis cinerea and effect on blueberry cuticle

成員:Meng Liu, Zihao Zong, Xiangjun Fang, Ruiling Liu, Honglei Mu, Hangjun Chen, Ben Niu, Haiyan Gao

論文因子:0 發(fā)表期刊:Journal of Agriculture and Food Research

注意：以上文獻(xiàn) 僅供參考

Q-瓊脂糖凝膠FF

Q-瓊脂糖凝膠FF