微量法 半胱氨酸(Cys)含量檢測(cè)試劑盒 

產(chǎn)品名稱(chēng): 半胱氨酸(Cys)含量檢測(cè)試劑盒 微量法

產(chǎn)品英文名: Micro Cysteine (Cys) Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC0185             產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣         產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：1120
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
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簡(jiǎn)要介紹：
蛋白質(zhì)含有三種含硫氨基酸：甲硫氨酸、胱氨酸和Cys。其中，Cys是一種含有巰基的含硫氨基酸，從甲硫氨酸轉(zhuǎn)化而來(lái)，并且可與胱氨酸互相轉(zhuǎn)化。Cys參與蛋白質(zhì)二硫鍵的形成，經(jīng)常是蛋白質(zhì)活性中心的組成部分，還可以為其它生理生化反應(yīng)提供巰基。此外，Cys大量積聚在皮膚和粘膜表面，在角蛋白生成中維持重要的巰基酶的活性，并且補(bǔ)充巰基，以維持皮膚的正常代謝，調(diào)節(jié)表皮下層的色素細(xì)胞生成的底層黑色素。具有美白、解毒、改善炎癥和過(guò)敏性皮膚等作用。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體50ml×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體10 ml×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。用前1天，向試劑三中加0.97mL蒸餾水充分溶解，再加磷酸0.25mL，混勻后蓋緊（防止水分散失）沸水浴2h；冷卻后加3.85mL蒸餾水，4℃可保存2周。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體0.5 ml×1支，100μmol/mL半胱氨酸標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明：
蛋白質(zhì)含有三種含硫氨基酸：甲硫氨酸、胱氨酸和半胱氨酸（Cys）。其中，Cys是一種含有巰基的含硫氨基酸，從甲硫氨酸轉(zhuǎn)化而來(lái)，并且可與胱氨酸互相轉(zhuǎn)化。Cys參與蛋白質(zhì)二硫鍵的形成，經(jīng)常是蛋白質(zhì)活性中心的組成部分，還可以為其它生理生化反應(yīng)提供巰基。此外，Cys大量積聚在皮膚和粘膜表面，在角蛋白生成中維持重要的巰基酶的活性，并且補(bǔ)充巰基，以維持皮膚的正常代謝，調(diào)節(jié)表皮下層的色素細(xì)胞生成的底層黑色素。具有美白、解毒、改善炎癥和過(guò)敏性皮膚等作用。
Cys還原磷鎢酸生成鎢藍(lán)，在600nm處有吸收峰；通過(guò)600nm吸光度，計(jì)算Cys含量。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：
低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、磷酸和蒸餾水。
操作步驟：
一、半胱氨酸提取：

1. 液體樣品中半胱氨酸提?。喝?/span>0.2mL液體樣品，加提取液0.3 mL，充分混勻，11000 rpm 4℃離心10min，取上清液，待測(cè)。
2. 組織中半胱氨酸提取：稱(chēng)取約0.2 g組織，加入0.5 mL提取液，冰上充分研磨，11000 rpm 4℃離心10 min，取上清液待測(cè)。

二、測(cè)定操作：

1. 標(biāo)準(zhǔn)液的配制：將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為40、20、10、8、4、2、1、0.5 μmol/mL 濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2. 按下表加入各試劑

混勻后室溫靜置15 min，于600nm處測(cè)定吸光值。
三、樣品中半胱氨酸含量計(jì)算：

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制：

以各標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為x軸，以?A（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）為y軸做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得到方程y=kx+b。將（A測(cè)定管-A對(duì)照管）帶入方程求x值。

2. 半胱氨酸含量計(jì)算：

（1）按液體樣本的體積計(jì)算
半胱氨酸含量（μ mol/mL）=x×V樣總÷V樣=2.5x
（2）按鮮重計(jì)算：
半胱氨酸含量（μ mol/g FW）=x×V樣÷（W×V樣÷V樣總）=2x÷W
V樣：反應(yīng)體系中加入的樣本體積 ，0.2 mL；V樣總：提取體系體積，0.5mL；W：樣品質(zhì)量，g。

相關(guān)文獻(xiàn)：
《Sulfur dioxide derivatives alleviate cadmium toxicity by enhancing antioxidant defence and reducing Cd2+ uptake and translocation in foxtail millet seedlings》 作者:Yansha Han,Mengyang Wu,Lihong Hao,Huilan Yi 期刊:Ecotoxicology and Environmental Safety 影響因子:4.527 PMID:29625394

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