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產(chǎn)品名稱:還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC1170

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒
DTNB 與 GSH 反應(yīng)生成復(fù)合物,在 412nm 處有特征吸收峰;其吸光度與 GSH 含量成正比。

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BC1170還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

 

還原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)含量測定試劑盒說明書

還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒?產(chǎn)品簡介:

GSH/GSSG是細(xì)胞內(nèi)重要的氧化還原對之一。因此,測定細(xì)胞內(nèi)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細(xì)胞所處的氧化還原狀態(tài)。

DTNB與GSH反應(yīng)生成復(fù)合物,在412nm處有特征吸收峰;其吸光度變化與GSH含量成正比。

還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒?試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:

可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1ml比色皿、雙蒸水

產(chǎn)品內(nèi)容:

試劑一×1支,充分溶解于50ml雙蒸水,4℃保存

試劑二×1支,充分溶解于50ml雙蒸水中,4℃保存

試劑三×1支,充分溶解于10ml雙蒸水中,4℃避光保存

還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒?操作步驟:

一、樣品前處理 :   

取組織約0.1g,加1ml試劑二,冰上充分研磨,8000rpm 4℃離心10min,取上清。(如上清不清澈,再離心3min)

GSH測定操作:

測定前將試劑一于25℃水浴20min

按每100mg組織加入1000µL生理鹽水的比例進(jìn)行勻漿。8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。   

對于非哺乳動物組織:按每100mg組織加入1000µL提取液的比例進(jìn)行勻漿。8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。

(2)血清(漿)樣品:直接檢測。

二、測定操作表:

 

測定管

空白管

樣本

0.1ml

/

試劑一

0.7ml

0.7ml

蒸餾水

/

0.1ml

試劑三

0.2ml

0.2ml

迅速混勻,于412nm測吸光值,并記錄第60s的OD值

GSH含量計(jì)算:

GSH標(biāo)準(zhǔn)曲線公式:y=0.0015x+0.0818(x為GSH濃度,y為吸光值)

液體中GSH(μmol/L)=[(OD測定管-OD空白管)-0.0818]/0.0015×樣品稀釋倍數(shù)

組織中GSH計(jì)算:

GSH(μmol/mg prot)=[(OD測定管-OD空白管)-0.0818]/0.0015×樣品稀釋倍數(shù)÷樣品蛋白濃度(Cpr)

GSH(μmol/g mass)=[(OD測定管-OD空白管)-0.0818]/0.0015×樣品稀釋倍數(shù)÷樣品質(zhì)量(g)

注意事項(xiàng):

(1)樣品處理等過程均需要在冰上進(jìn)行,且須在當(dāng)日測定酶活力,以免影響其活力測定時(shí),除試劑一外,其它試劑均需放置在冰上;

(2)樣本測定前先取1-2個樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如吸光值太高(超過標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍,即y>0.2時(shí)),應(yīng)先用試劑二稀釋到適當(dāng)倍數(shù),使得吸光值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。

(3)處理后樣品不能用于蛋白濃度測定  

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